Generalidades de los Hongos Patógenos
Generalidades de los Hongos Patógenos y Principales Técnicas Micológicas
Micología
Es la ciencia que se ocupa del estudio de los hongos.
La palabra micología deriva del griego mykes = seta y logos = discurso; etimológicamente es el estudio de las setas.
Los hongos son seres de organización eucariótica (célula diferenciada, con membrana nuclear y orgánulos citoplasmáticos), portadores de esporas, desprovistos de clorofila, heterótrofos, unicelulares o filamentosos, con paredes celulares quitinosas o de otros carbohidratos complejos, que se nutren por absorción. Con reproducción asexual por esporas y a veces sexual.
Los hongos juegan un papel importantísimo en nuestra vida. Puede decirse que no pasa un día sin que nos veamos beneficiados o perjudicados, directa o indirectamente por ellos.
Los hongos desempeñan un importante papel en los cambios lentos pero constantes que tienen lugar en nuestro entorno. Son responsables de la desintegración de la materia orgánica, son causantes de la mayoría de las enfermedades de las plantas y de algunas enfermedades de animales y del hombre. Intervienen en la fermentación del pan, del vino, cerveza, cacao, quesos. Son empleados en la fabricación de ácidos orgánicos, drogas (ergometrina y cortisona), vitaminas, responsables de la fabricación de antibióticos (Penicilina y Griseofulvina).
Son organismos destructivos y beneficiosos para la agricultura, primeramente por causar grandes plagas que destruyen las cosechas y beneficiosos en cuanto a que descomponen los restos vegetales debido a su capacidad para utilizar la celulosa, de esta manera los nutrientes de las plantas pasan al suelo de forma disponible para las plantas. Finalmente no se puede pasar por alto que suponen para el paladar ciertos hongos como el champiñón y otras setas comestibles.
El aparato vegetativo de los hongos está constituido por hifas cuyo conjunto forma un micelio vegetativo. Este puede ser de dos tipos: unicelular (formado por células aisladas que se reproducen por gemación (Fig 1), como las levaduras), o filamentosos (con hifas septadas o tabicadas (Fig 2) o sin tabicar o cenocíticas (Fig 3)). Existe un tipo intermedio, el pseudomicelio (Fig 4) formado por blastosporas como Candida spp.
El micelio reproductor (micelio de fructificación) forma esporas de origen sexual o asexual (conidios). Estas estructuras reproductoras se diferencian de las somáticas y son utilizadas para la clasificación de los hongos; pocos hongos pueden identificarse si estas estructuras no se encuentran disponibles.
La espora (spora = semilla) es una unidad diminuta que se propaga sin un embrión y que da lugar a un nuevo individuo de la misma especie.
Los filamentos que constituyen el soma fúngico crecen apicalmente.
La reproducción sexual es conocida como teleomórfica.
La reproducción asexual es también denominada anamórfica.
Clasificación del Reino Fungi
Se reconocen seis divisiones dentro de este reino:
- División MIXOMYCOTA: hongos sin pared celular. Son hongos mucilaginosos.
- División PLASMODIOPHOROMYCOTA
Hongos verdaderos: EUMYCOTA, con pared celular:
- División CHYTRIDIOMYCOTA: cadenas celulares primitivas unidas a un sustrato por medio de rizoides que terminan en punta. Las zoosporas tienen un solo flagelo en forma de látigo.
- División OOMYCOTA: micelio cenocítico. Zoosporas con dos flagelos, uno dirigido hacia el frente y el otro hacia atrás. Esta división fue bastante tiempo considerada un hongo, pero hace poco por un consenso se creó un nuevo reino, separándolo así del Reino Fungi e insertándolo en el nuevo reino, el Reino Chromista, el cual está mucho más cerca de las algas que de los hongos.
- División ZYGOMYCOTA
- División GLOMEROMYCOTA
- División ASCOMYCOTA
- División BASIDIOMYCOTA
- División DEUTEROMYCOTA
Reproducción Asexual
Consideramos la reproducción asexual como aquella mediante la cual se originan individuos de la misma especie a partir de una sola célula o de un talo pluricelular que se fracciona y cada fragmento da lugar a un nuevo individuo. Las formas de reproducción asexual se pueden dividir de la siguiente manera:
- Fragmentación del soma, transformándose cada fragmento en un nuevo individuo.
- Fisión de células somáticas para dar lugar a células hijas.
- Gemación de células somáticas o de esporas, produciendo cada yema un nuevo individuo.
- Producción de esporas, cada una de las cuales germina formando un tubo germinal que crece hasta dar un nuevo micelio.
Esporas asexuales:
- esporangiosporas
- artrosporas
- blastosporas
- clamidosporas
- conidios: que pueden ser unicelulares o pluricelulares
1. Unicelulares:
Sin conidióforos:
- Sésiles
- Pedúnculados
- Aislados
- En racimos
Con conidióforo:
- Simples
- Ramificados
Por su morfología: Piriformes, Mazudos, Esféricos, Ovales
Por su superficie: Lisos, Rugosos, Equinulados
2. Pluricelulares:
- Macroconidios
Conidiogénesis
Técnicas Micológicas
Toma de muestras
La recogida de la muestra ha de ser realizada en condiciones asépticas. En pacientes tratados hay que dejar 4–5 días sin tratamiento. Si se han aplicado pomadas o polvos, lavar con suero fisiológico y repetir si el resultado fuera negativo.
Las muestras pueden ser:
- Escamas: cogidas por raspado con el borde del bisturí o con el de un portaobjetos.
- Pelos: arrancados con pinzas de los bordes de la lesión, principalmente aquellos que se vean rotos o de aspecto blanquecino.
- Uñas: raspar la uña por dentro y también del surco periungueal.
- Orina y líquido cefalorraquídeo: sedimentación previa.
- Esputos: recogidos en tarro estéril añadiendo igual cantidad de solución 0,5% de N-acetil-L-cisteína y centrifugar.
- Exudados, heces o sangre: recogidos en tarros estériles.
- Biopsias.
Examen Directo
- Las lesiones pueden ser observadas por fluorescencia ayudándonos de una lámpara de Wood (3.600 Å). Uso: en una habitación obscura, a una distancia de 10–12 cm, observar fluorescencia.
- Escamas, pelos y uñas, calentando suavemente en un porta con líquido aclarante (KOH, lactofenol).
- L.C.R.: tinta china, test látex.
- Exudados, esputos, heces, etc.: Giemsa, Gram, etc.
Cultivos
Los medios de cultivo suelen llevar sales, una fuente hidrocarbonada (azúcares diversos o miel), una fuente de N inorgánico (sales de amonio o nitratos, etc.), N orgánico (sustancias proteicas, peptonas o aminoácidos), vitaminas y oligoelementos.
Se suele añadir antibióticos para inhibir el crecimiento bacteriano (cloranfenicol 0,5% g/l, o gentamicina 0,05% g/L) pero siempre que no actúen sobre la especie a aislar.
También se añaden inhibidores del crecimiento de hongos contaminantes, cicloheximida o actidiona, a una concentración de 0,05% g/l.
En ocasiones también se añaden sustancias colorantes: rojo fenol, sales de tetrazolio, etc.
El pH ha de ser ligeramente ácido para inhibir el crecimiento bacteriano; en medios con antibióticos el pH utilizado suele ser neutro.
La temperatura de cultivo es normalmente entre 25–30 ºC, pero algunos casos necesitan 37 ºC.
Los medios utilizados suelen ser sólidos salvo excepciones; así tenemos:
- Sabouraud dextrosa agar: a veces con antibióticos y actidiona.
- Sabouraud dextrosa agar con tetrazolio.
- Agar miel de Sabouraud con actidiona.
- Dermatofitos agar test.
Habitualmente se siembra en un tubo con actidiona y otro sin actidiona. Si se sospecha de levaduras se pueden utilizar medios con sales de tetrazolio. Si se sospecha de actinomicetales, Sabouraud dextrosa sin antibióticos.
Medios de identificación de dermatofitos:
- Sabouraud esporulación o agar-harina de maíz: producción de esporas asexuales.
- Patata-glucosa agar: producción de pigmentos.
- Granos de arroz-agua: selección de crecimiento.
- Extracto de levadura más pelos: perforación del pelo.
- Agar-dextrosa-urea: ureasa.
Identificación para levaduras:
- Suero inactivado: filamentación o blastosis.
- Arroz-agar tween-80 (RAT): clamidosporas y pseudomicelio.
- Zimograma C: fermentación azúcares.
- Auxonograma C: aprovechamiento de azúcares.
- Api-aux y Pasteur-Yeast-System: identificación completa de levaduras.
Observación y manejo de los cultivos:
Se toma una pequeña porción de colonia tomando incluso el agar sobre la que ha crecido si son hongos pluricelulares; si son levaduriformes el tratamiento es idéntico al bacteriano. Se colocan unas gotas de lactofenol o azul-algodón, se coloca entre porta y cubre, se calienta al mechero y una vez derretido el agar se visualiza al microscopio.
Micosis Más Importantes en Veterinaria
Las afecciones fúngicas reciben el nombre de micosis. Se clasifican según (1) en:
Micosis Superficiales o Dermatomicosis
- Tricofitosis (afecta a pelo y piel).
- Microsporiasis (afecta al pelo).
- Favus (escudetes).
- Epidermofitosis (afecta a epidermis).
- Onicomicosis (afecta a uñas).
Micosis Sistémicas
- Fúngicas primarias (hongos patógenos obligados).
- Fúngicas secundarias (hongos saprofitos que en momentos determinados se comportan como patógenos).
Micotoxicosis
Enfermedades tóxicas provocadas por productos metabólicos venenosos de mohos.